通常，设计用于蛋白质化学修饰的硫醇反应试剂不能直接用于修饰细胞内靶点，因为细胞内存在的毫摩尔浓度的谷胱甘肽有效地超过了与靶点硫醇的反应。在这里，我们报告了一种平衡熵策略，用于使用具有两个反应位点的氰基丙烯酸基硫醇反应交联剂（cyanoacrylate-based thiol-reactive cross-linker, BCNA）实现目标选择性。与单硫醇反应相比，该化合物与含有适当间隔的双硫醇的目标肽和蛋白质反应的选择性大于200倍。交联剂偶氮苯部分的光异构化可用于影响目标肽或蛋白质的构象。这种方法为化学修饰细胞内肽和蛋白质靶点提供了一种通用策略。

启发

J. Am. Chem. Soc. 2014, 136, 36, 12624–12630

Nat Commun 11, 5841 (2020)

应用

在目前的形式中，这种针对Cys残基对的策略没有达到双砷试剂所看到的有效结合亲和力。有效的细胞内使用可能需要额外的氰基丙烯酸酯基团或其他增强靶亲和力的方法。然而，试剂以最小的灵活性将偶氮苯单元直接连接到肽主链。BCNA加合物中保留了光异构化，E/Z异构化可用于触发附加肽和蛋白质的构象变化。此外，该试剂对靶向α-螺旋中的Cys残基对具有特异性，其中Cys残基在一级序列中间隔i，i+7。因此，该方法为开发光开关或其他特定蛋白质修饰试剂提供了一个起点，以避免与砷相关的潜在毒性。

通常，设计用于蛋白质化学修饰的硫醇反应试剂不能直接用于修饰细胞内靶点，因为细胞内存在的毫摩尔浓度的谷胱甘肽有效地超过了与靶点硫醇的反应。在这里，我们报告了一种平衡熵策略，用于使用具有两个反应位点的氰基丙烯酸基硫醇反应交联剂（cyanoacrylate-based thiol-reactive cross-linker, BCNA）实现目标选择性。与单硫醇反应相比，该化合物与含有适当间隔的双硫醇的目标肽和蛋白质反应的选择性大于200倍。交联剂偶氮苯部分的光异构化可用于影响目标肽或蛋白质的构象。这种方法为化学修饰细胞内肽和蛋白质靶点提供了一种通用策略。

启发

J. Am. Chem. Soc. 2014, 136, 36, 12624–12630

Nat Commun 11, 5841 (2020)

应用

在目前的形式中，这种针对Cys残基对的策略没有达到双砷试剂所看到的有效结合亲和力。有效的细胞内使用可能需要额外的氰基丙烯酸酯基团或其他增强靶亲和力的方法。然而，试剂以最小的灵活性将偶氮苯单元直接连接到肽主链。BCNA加合物中保留了光异构化，E/Z异构化可用于触发附加肽和蛋白质的构象变化。此外，该试剂对靶向α-螺旋中的Cys残基对具有特异性，其中Cys残基在一级序列中间隔i，i+7。因此，该方法为开发光开关或其他特定蛋白质修饰试剂提供了一个起点，以避免与砷相关的潜在毒性。